17 Przykład enzymu endonukleazy, który powinieneś wiedzieć

Endonukleazy to enzymy, które pękają DNA na mniejsze fragmenty poprzez rozszczepienie wiązania fosfodiestrowego wewnątrz łańcucha polinukleotydowego. Zobaczmy kilka przykładów.

  1. Endonukleaza RecBCD
  2. Endonukleaza T7
  3. Endonukleaza T4 II
  4. Endonukleaza Bal 31
  5. Endonukleaza I
  6. Nukleaza mikrokokowa
  7. Endonukleaza II
  8. nukleaza S1
  9. P1-nukleaza
  10. Nukleaza z fasoli mung I
  11. Enzym DNaza I (P00639)
  12. Endonukleaza AP
  13. BamHI 
  14. EcoRI 
  15. EcoRV 
  16. HindIII
  17. Hae III

Endonukleaza RecBCD

RecBCD endonukleaza jest wyprodukowano w E. coli komórek. Jest częściowo zależny od ATP i działa w rekombinacji i naprawie. Enzym RecBCD wykonuje podwójna rola nukleazy i helikazy, który opróżnia lub oddziela nici DNA i generuje jednoniciowe nacięcia w DNA.

Endonukleaza T7 (P00641)

Fag T7 (gen 3) jest źródłem Enzym endonukleazy T7. Replikacja wymaga DNA ze skłonnością do pojedynczych nici na podwójnych niciach. Enzym, który szczególnie wiąże się z i rozcina czterokierunkowe (Holliday) złącza DNA po wirusowej replikacji genomowej w celu rozwiązania połączeń.

Endonukleaza T4 II (P07059)

Fag T4 (denA) jest źródłem Endonukleaza T4 II . Oligonukleotydy zakończone na końcu 5'-dCMP wytwarzane przez ten enzym są odszczepiane od sekwencji -TpC-; długość łańcucha produktu różni się w zależności od sytuacji. Pomoce w degradacja DNA gospodarza, umożliwiając tworzenie fagowego DNA poprzez wychwytywanie nukleotydów z gospodarza.

Endonukleaza Bal 31

P. espejiana jest źródłem Endonukleaza Bal 31 . Dodatkowo, końce 3' i 5' dupleksu DNA są zmieniane przez tę endonukleazę. Co najmniej dwie nukleazy w połączeniu z szybkimi i wolnymi enzymami.

Endonukleaza I (endo I; P25736)

E. coli (koniec A) jest źródłem Endonukleaza I. Mutanty Endo I nadal rozwijają się prawidłowo, mimo że znajdują się w peryplazmie, wykazując średnią długość łańcucha wynoszącą siedem, byłyby hamowane przez tRNA, powodując dwuniciowe addukty DNAi generowanie nacięć po skompleksowaniu z tRNA.

Nukleaza mikrokokowa (P00644)             

Staphylococcus jest źródłem Nukleaza mikrokokowa. Tworzy końce 3′-P, faworyzuje jednoniciowy DNA i regiony bogate w AT, wymaga wapnia i wpływa na RNA. Enzym, który rozbija wiązania 5' fosfodiestrowe zarówno w DNA, jak i RNA.

Endonukleaza II (endo VI, egzo III; P09030)

Coli (xthA) jest źródłem endonukleazy II. W pobliżu miejsca dekoltu znajduje się również 3′–>5′ egzonukleaza, a końce 3'-P mają fosfomonoesterazę. Pierwotny RE w E. coli jest endonukleazą apurynowo-apirymidynową.

nukleaza S1 (P24021)

Aspergillus oryzae jest źródłem. Dotyczy to również RNA. Tylko degraduje jednoniciowy DNA i RNA; brak widocznej preferencji dla zasad. Produktami końcowymi rozszczepienia endonukleolitycznego są 5'-fosfomononukleotyd i 5'-fosfooligonukleotyd.

P1-nukleaza (P24289)

Penicillium citrinum jest źródłem. Dotyczy to również RNA. Tylko degraduje jednoniciowy DNA i RNA; brak widocznej preferencji dla zasad. Produkty końcowe wytwarzane przez rozszczepienie endonukleolityczne obejmują 5'-fosfomononukleotyd i 5'-fosfooligonukleotyd.

Nukleaza z fasoli mung I

Kiełki fasoli mung jest źródłem. Dotyczy to również RNA. Jednak dwuniciowy DNA, hybrydy DNA/RNA lub dwuniciowy RNA nie są rozkładane przez enzym. Tylko produkuje nukleozydy 5′-monofosforany gdy jednoniciowy DNA lub RNA jest rozbity.

Enzym DNaza I (P00639)

Trzustka bydlęca jest źródłem. Produkt ma średnio czteroogniwowy łańcuch, a Mn2+ powoduje zerwanie podwójnej nici. Endonukleaza surowicy jest produkowany przez wiele zewnątrzwydzielniczy i narządów dokrewnych i znajduje się w płynach ustrojowych.

Endonukleaza AP

Jądro i mitochondria są źródłami. Obejmuje ścieżkę naprawy DNA przez wycięcie podstawy. DNA-BER wykorzystuje enzym endonukleazy AP (ścieżka naprawy przez wycinanie zasad).

BamHI

BamHI, endonukleaza restrykcyjna typu II generowana przez Bacillus amyloliquefaciens, potrafi wykryć krótkie (6 pz) sekwencje DNA i wyciąć je dokładnie w miejscu docelowym.

EcoRI

EcoRI jest enzymem restrykcyjnym endonukleazy to jest element systemu modyfikacji ograniczeń i rozkłada podwójne helisy DNA na fragmenty w określonych miejscach.

EcoRV 

EcoRV jest endonukleazą restrykcyjną typu II to idzie pod nazwą Eco32I. Jest szeroko stosowany enzym restrykcyjny w biologii molekularnej.

HindIII

Enzym restrykcyjny dezoksyrybonukleazy specyficzny miejscowo dla Haemophilus influenzae typu II hydrolizuje kofaktor Mg2+ złamać palindromiczną sekwencję DNA, AAGCTT.

Kredyty Image: HindIII Witryna Ograniczenia by Helixitta (CC BY-SA 4.0)

HaeIII

HaeIII to endonukleazy który chroni organizmy przed niezidentyfikowanym, zewnętrznym DNA. Jest wykorzystywany w laboratoriach biologii molekularnej. Była to trzecia endonukleaza odkryta w bakterii Haemophilus aegyptius

Wnioski

Enzymy zwane endonukleazami rozkładają wiązanie fosfodiestrowe znajdujące się w łańcuchach polinukleotydowych. Podczas gdy wiele enzymów tnących DNA rozszczepia bardzo specyficzne sekwencje nukleotydowe, inne, takie jak dezoksyrybonukleaza I, łamią DNA nieco losowo (bez względu na sekwencję).

Przewiń do góry